CAS OpenIR
基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌
陈旭1; 毛瑞2; 李堂正3; 乔宇4; 彭晴4; 杜昱光2
2019
Source Publication沈阳农业大学学报
ISSN1000-1700
Volume050Issue:002Pages:174
Abstract食源性致病菌污染是食品安全问题的重要隐患之一,沙门氏菌是食品中最常见的食源性致病菌。为快速检测食品中的沙门氏菌,满足食品生产过程中实时检测监控的需要,基于竞争性互补介导核酸恒温扩增(competitive annealing mediated isothermal amplification,CAMP)技术,建立一种操作简便、准确性高、灵敏度高的沙门氏菌快速检测方法。以沙门氏菌invA基因保守区域片段为靶序列,利用DNAMAN设计特异性引物,并在己筛选获得沙门氏菌的CAMP引物基础上,应用CAMP引物设计推荐规则及作用位点,进行加速引物的设计和筛选,评估加速引物对扩增反应的影响;并且对建立的方法进行特异性及灵敏性的检测评估。同时与PCR方法进行比较。结果表明:以沙门氏菌invA基因为目标核酸所设计的一对CAMP引物可以实现对沙门氏菌的快速检测,而且在反应体系中引入加速引物可以将检测时间缩短15min;PCR方法的检测限为103CFU·mL^-1,而本研究所建立的方法在65℃恒温条件下80min内检出沙门氏菌,检测限为10CFU·mL^-1,检测效率和灵敏度均优于传统PCR方法,而且操作简便,无需精密、复杂的变温仪器;对3株沙门氏菌和10株非沙门氏菌进行特异性检测,3株阳性对照株检测全部为阳性,10株阴性对照菌检测全部为阴性,说明本试验所建立沙门氏菌快速检测方法具有良好的特异性,而且对沙门氏菌无漏检,具有较好的通用性。
Language英语
Document Type期刊论文
Identifierhttp://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/35857
Collection中国科学院过程工程研究所
Affiliation1.沈阳农业大学
2.中国科学院过程工程研究所
3.黑龙江大学
4.中国农业科学院饲料研究所
Recommended Citation
GB/T 7714
陈旭,毛瑞,李堂正,等. 基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌[J]. 沈阳农业大学学报,2019,050(002):174.
APA 陈旭,毛瑞,李堂正,乔宇,彭晴,&杜昱光.(2019).基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌.沈阳农业大学学报,050(002),174.
MLA 陈旭,et al."基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌".沈阳农业大学学报 050.002(2019):174.
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