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大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文)
杨青; 胡学军; 许小明; 高晓蓉; 安利佳; 苏志国; J.C.JANSON
2002
Source Publication生物化学与生物物理进展
Issue03Pages:390-393
Abstract根据同源性分析设计引物 ,通过RT PCR方法从大连蛇岛蝮蛇毒腺总RNA中合成扩增出类凝血酶基因 ,之后将该基因克隆到表达载体 pPIC9K中 ,经电激转化后整合至毕赤酵母细胞基因组中 .经筛选得到甲醇快速生长型转化子His+ Mut+ 在 5 0 0ml摇瓶中培养 ,甲醇诱导分泌表达 .上清液中重组类凝血酶是通过两步柱层析得到 :QSepharoseFF和Benzamidine Sepharose 4BCL .与天然蛇毒类凝血酶一致 ,分泌表达的重组类凝血酶具有较强的酯酶活性 ,但精氨酸甲酯如TAME的水解活性较弱 .此重组类凝血酶在 37℃中性溶液中保存过夜将分解成小肽 ,但在 0℃下很稳定 .该酶的最适pH为 8 0 .
Keyword类凝血酶 克隆 表达 纯化 特性表征
Document Type期刊论文
Version出版稿
Identifierhttp://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/6944
Collection研究所(批量导入)
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GB/T 7714
杨青,胡学军,许小明,等. 大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文)[J]. 生物化学与生物物理进展,2002(03):390-393.
APA 杨青.,胡学军.,许小明.,高晓蓉.,安利佳.,...&J.C.JANSON.(2002).大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文).生物化学与生物物理进展(03),390-393.
MLA 杨青,et al."大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文)".生物化学与生物物理进展 .03(2002):390-393.
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